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微旋基因科普讲堂原核生物中的佼佼者常

刘军连出诊时间 http://pf.39.net/bdfyy/bjzkbdfyy/210901/9392527.html
在分子实验过程中,我们努力设计质粒,精心挑选最优的启动子,煞费苦心地克隆到特定的载体上,反复确认是否添加了正确的标签和入核信号(NLS),并且为了直观还在IRES的下游连接一个荧光蛋白。真的做了太多工作!同样,我们也需要了解那个通过其辛勤劳动来帮助我们复制新质粒的原核生物中的佼佼者——大肠杆菌。目前市面上不同的大肠杆菌菌株不可胜数——快速搜索就会发现有数百种。这还只包括设计用于亚克隆或蛋白表达的一般实验室菌株。如果再计算上定制菌株,数量可能在数千不止!希望本篇文章可以为您提供一定的背景知识,使您能够区分常用实验室菌株的特征,并确定它是否能用于扩增您的质粒或进行您的实验。大肠杆菌的菌株历史大肠杆菌是一种革兰氏阴性的杆状细菌,以科学家TheodorEscherich博士的名字命名,他于年首次描述了大肠杆菌。大肠杆菌主要存在于动物的肠道中。有许多自然产生的不同种大肠杆菌菌株,其中一些对人类是致命的。如今使用的大多数常见的商品化的实验室大肠杆菌菌株都来自于两个单独的分离株:K-12菌株和B菌株。K-12菌株于年从一名患者体内分离出来,最终形成常见的实验室菌株MG,继而产生了DH5a和DH10b(也称为TOP10)。而B型菌株由于研究人员的共享和重命名产生了复杂的历史背景。它可能是在年分离出来的,但在年首次被称为“B株”。BL21菌株(及其衍生物)是B型大肠杆菌菌株最常见的例子。实验室常用大肠杆菌菌株你今天看到的大多数商品化菌株都有特定的目的:快速增长,高通量克隆,常规克隆,克隆异变的DNA,制备未甲基化的DNA等等。特别是使之有重大改进的,如那些提高质粒产量或DNA质量的突变株许多都存在于商业品系中。下面的Table1概述了在大肠杆菌菌株中发现的一些较常见的突变,Table2概述了大肠杆菌的常见实验室菌株。表1:大肠杆菌常见基因突变表2:大肠杆菌实验室菌株注:一般情况下,特定基因的失活突变以典型标准的负号(-)表示;仅仅把基因列出来就表明它没有功能;如果一个基因被删除,通常用希腊delta标记(Δ)。近期培训班汇总

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