大家早安，今天学习和分享的文献来自于今年4月刚刚发表的一篇文章，明确术后即刻的免疫荧光检查和术后常规病理结果之间的对应关系，和对我们未来肿瘤局部消融方式的影响。
结直肠癌肝转移灶消融区的荧光组织评估：完全肿瘤消融的潜在实时生物标志物
摘要
背景：本研究旨在评估结直肠癌肝转移（CLM）消融后立即快速荧光组织检查是否与标准病理和免疫组化（IHC）评估相关。
方法：这项前瞻性的国立卫生研究院支持的研究纳入了34例患者，其中53枚CLM在年1月至年12月期间消融。消融后立即进行消融区的核心针活检。用荧光活力染色（MitoTrackerRed）和核染色（Hoechst）评估组织样品。在消融后30分钟内进行共聚焦显微镜成像。随后固定相同的样品并用苏木精和曙红（H＆E）染色。肿瘤细胞采用IHC染色以明确增殖力（Ki67）和活力（OxPhos）。病理学家对H＆E和IHC的结果不知情下，分别评估荧光染色图像以检测活肿瘤细胞。计算荧光染色与H＆E和IHC评估的灵敏度，特异性和总体一致性。
结果：共收集并处理了63个组织样本。立即荧光和随后的H＆E和IHC评估之间的总体一致率为94％（59/63）。用于鉴定肿瘤细胞的荧光染色评估灵敏度和特异性分别为％（18/18）和91％（41/45）。
结论：该研究显示即刻荧光染色与消融区的标准H＆E和IHC评估之间具有高的一致率。鉴于CLM消融后消融区组织细胞特征的预后价值，荧光评估提供了完整肿瘤消融的潜在的术中生物标志物。
经皮影像引导的肿瘤消融术是一种外科手术的替代治疗方法，对肝肿瘤较小的患者具有非常高的安全性和有效性。经皮消融技术的局限性包括不完全的肿瘤消融和局部肿瘤进展（LTP）。因此，开发可实时应用的预后标记物来识别消融不完全和LTP风险增加的患者是至关重要的。这些标记物可以指导在同一手术过程中进行附加消融，或表明需要早期给予辅助治疗。
这项前瞻性研究旨在评估荧光染色快速组织检查（在消融和活检后30分钟内）是否可行，并与已知的标准病理检查向对应，显示有活性的肿瘤细胞，在预测消融术后LTP方面是否具有明确的预后价值。
材料和方法
所有患者在手术后立即进行完全肿瘤消融评估，然后在消融后6周（±2周）用三期对比增强CT进行评估。当消融区完全覆盖目标肿瘤时，消融被认为在技术上是成功的。
在完成肿瘤消融后，立即使用对比增强CT和/或PET/CT从消融区域的中心和边缘用18-20G的核心活检针活检。为了本研究的目的，一些组织样品被提交（新鲜）用于分子细胞学核心设施中的立即荧光分析，一部分随后固定用于进一步的形态学和IHC分析。
结果：
对于肿瘤与凝固性坏死和正常肝实质的鉴别，即刻荧光染色和标准H＆E检查之间的总体一致率为94％（59/63）。用于标准H＆E上的肿瘤阳性样品的荧光染色灵敏度为％（18/18），特异性为91％（41/45）。在H＆E显示肿瘤细胞的18个标本中，用IHC进一步处理，16个标记Ki67和OXP均为阳性。一个标本仅为Ki67阳性，在一个标本中，收集的组织不足以用IHC进行评估。
讨论：
我们的研究结果表明，快速组织分析中使用的荧光MTRed和Hoechst染色可能是完全消融肝肿瘤，特别是CLM的可能直接生物标志物。这种组合解决了每种荧光染料在单独使用时的缺点。尽管MTRed可以区分活细胞和坏死/凋亡细胞，但它不能区分良性细胞和恶性细胞。Hoechst的核标记似乎提供了与H＆E等效的结果并有助于检测肿瘤细胞，但它无法评估活力。两种染色剂的组合提供了对残留的活肿瘤细胞进行快速检查的能力，与费时的标准病理学评估相比具有相对高的一致率（94％）。
我们先前研究显示肝肿瘤的Ki67阳性肿瘤细胞与较短的无LTP和总体存活相关。来自消融区的Ki67阳性肿瘤细胞的存在是较短的无LTP存活率的独立预测因子（风险比，5.1）。
本研究中，没有根据荧光染色的结果做出进一步治疗的决定。在治疗规范中加入荧光染色评估将是未来临床试验的一部分。
总之，鉴于组织特征对于CLM患者的局部肿瘤无进展和总体存活的预后价值，用荧光染色评估消融区组织似乎提供是否残余肿瘤或影像引导肿瘤完全消融的术中生物标记物。这一发展可以解决某些消融以及其他影像引导的局部区域治疗的关键问题。
原文：
SotirchosVS,FujisawaS,VakianiE,SolomonSB,Manova-TodorovaKO,SofocleousCT.FluorescentTissueAssessmentofColorectalCancerLiverMetastasesAblationZone:APotentialReal-TimeBiomarkerofCompleteTumorAblation.AnnSurgOncol.Jun;26(6):–40.
译者述评：
本研究的意义在于消融医生也可以像外科医生送快速冰冻病理一样在术中进行消融后即刻快速荧光病理检查，已确定消融的效果和是否需要进一步扩大消融。
目前由于各种条件的限制，这种技术在国内还无法常规开展，但也为我们指明了未来的方向。
该研究进一步提升了消融治疗后肿瘤进行活检和免疫组化检查的必要性，结果将对消融后的进一步随访和综合治疗提供依据。
希望对大家有所帮助
（医院介入科靳勇编译）
译者简介：
靳勇国务院政府特殊津贴专家、医院介入科主任、主任医师、医学博士、硕士生导师、中国抗癌协会肿瘤介入治疗委员会委员、中国抗癌协会肺癌微创综合治疗委员会常委、科技部创新产业联盟肺癌消融委员会副主任委员、江苏省抗癌协会肿瘤介入治疗委员会常委、江苏省介入医学会委员兼妇幼介入学组副组长、江苏省妇幼学会妇产介入委员会副主任委员、苏州市介入医学会副主任委员。曾荣获苏州大学优秀共产党员、苏州市卫生系统优秀共产党员及青年文明标兵、苏州市医德医风标兵、苏大附二院“十佳”医生等称号。
专业特长：
1.肝硬化消化道大出血、顽固性腹水、门静脉血栓的介入治疗
2.肝癌、肺癌、肝血管瘤等良恶性实体肿瘤的介入微创治疗
3.食道、胃肠道、呼吸道狭窄及胆道梗阻的介入微创支架治疗
4.出血及血栓栓塞性疾病的介入微创治疗
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